Die Heldinnen des Romans sind sechs Mädchen-Schulmädchen, die durch den Willen ihrer geliebten Lehrerin, Miss Gene Brody, im "Brody-Clan" vereint sind. Die Aktion findet in den dreißiger Jahren in Edinburgh statt. Miss Brodie leitet eine Grundschule für kleine Mädchen an einer angesehenen Privatschule. In einer der ersten Lektionen der Geschichte erzählt Miss Brody anstelle eines Vortrags die tragische Handlung ihrer ersten Liebe - ihr Verlobter starb eine Woche vor dem Waffenstillstand im Krieg -, die die Mädchen zu Tränen rührt. So beginnt ihr Unterricht in "Wahrheit, Gut und Schönheit" mit den unkonventionellsten Methoden. Sie gab sich der Kindererziehung hin und gab ihnen in ihrem eigenen Lieblingsausdruck "die Früchte ihrer Blütezeit".
Miss Brodie war in ihrer Blütezeit trotz unkonventioneller Methoden überhaupt kein außergewöhnliches Ereignis oder nicht ganz in ihrem Kopf. Ihre Einzigartigkeit bestand nur darin, dass sie an einer so konservativen Bildungseinrichtung unterrichtete. In den dreißiger Jahren, wie Miss Brody, gab es Legionen: Frauen ab dreißig Jahren, die ihr altes Leben in mittelloser Kriegsführung mit lebhaften Aktivitäten in den Bereichen Kunst und soziale Sicherheit, Aufklärung und Religion füllten. Einige waren Feministinnen und förderten die fortschrittlichsten Ideen, andere beschränkten sich auf die Teilnahme an Frauenausschüssen und kirchlichen Versammlungen. Frauen der ersten Kategorie unterrichteten natürlich nicht an konservativen Schulen, da sie keinen Platz hatten. Das dachten die Kollegen von Miss Brodie. Aber Miss Brody, umgeben von ihren auserwählten Schülern, dem Brody-Clan, blieb für Intrigen unzugänglich. "Unerschütterlich wie ein Stein", bewundern ihre Bewunderer, als sie stolz den Schulkorridor entlang zu den verächtlichen Grüßen ihrer gewöhnlicheren Kollegen geht.
Miss Brodie scheint außergewöhnlich, zumindest in einer Schule. Sie ist nicht schön und überhaupt nicht jung, aber zur Zeit „ihrer Blütezeit“ erlebt sie Blitze von echtem Charme, und in solchen Momenten ist sie ungewöhnlich gut. Sie ist auch für Männer äußerst attraktiv und gewinnt die Herzen der beiden einzigen männlichen Lehrer in der Schule.
Mit der Blütezeit von Miss Brody finden die ersten Schritte einer erstaunlichen spirituellen Entwicklung statt, die sich intern und extern so schnell ändern wie ihre wachsenden Schüler. Während die Mädchen noch unter ihrer Aufsicht in Grundschulklassen studieren, verwandelt Miss Brody den Unterricht in Mathematik, Englisch oder Geschichte in eigenartige Exkursionen in allen Bereichen der menschlichen Kultur, von Erotik bis Faschismus: Ihre leidenschaftliche künstlerische Natur, die keine religiösen Verbote kennt, verehrt beide und inzwischen Giotto und Mary Stuart.
Allmählich, unmerklich für sich selbst, wächst ein riskanter Glaube an ihre eigene Sündenlosigkeit in ihr; In seiner Blütezeit überschreitet es die Grenzen jeder Ethik und erreicht einen wirklich schockierenden Grad an Unmoral.
Bisher ist sein Einfluss auf den Brody-Clan jedoch unbegrenzt. Es besteht aus sechs Mädchen: Monica Douglas, bekannt für mathematische Fähigkeiten und wilde Wutausbrüche, die athletische Eunice Gardner, die anmutige Jenny Gray, die schlagfertige Mary McGregor, Sandy Stranger mit ungewöhnlich kleinen Schweineaugen und die später für ihren Sexappeal Rose Stanley berühmt wurde. Sie wachsen unter dem starken spirituellen Einfluss von Miss Brody, ihr inneres Leben ist vollständig mit einer Analyse der Beobachtungen ihres Lehrers gefüllt. Einmal während eines Ausfluges erklärt Miss Brody den Mädchen, was es eigentlich bedeutet, ihr etwas beizubringen. Sie bildet Kinder aus und hebt die Eigenschaften hervor, die ihnen von Natur aus innewohnen. Sie muss jedoch auch in Informationen investieren, die ihnen fremd sind. Sie überzeugt den "Clan", dass jedes Mädchen im Erwachsenenalter "ihre Berufung" finden und verwirklichen muss, wie sie sie in ihnen gefunden hat.
Fräulein Brodie ist auf dem Höhepunkt ihrer Blütezeit; Mädchen wachsen auf und entwickeln sich mit ihr. Es scheint ihr, dass niemand besser als sie die wahre Berufung der Kinder erraten kann und verzweifelt Anstrengungen unternimmt, um die Mädchen auf dem einzig richtigen Weg zu führen, wie es ihr scheint.
Jeder der "Brody-Clans" lebt ein individuelles und einzigartiges Schicksal, ganz anders als die Berufungen von Miss Brody. Ihre posthume Rolle in ihrem Erwachsenenleben ist viel subtiler und komplexer.
Tragischer als die anderen ist Mary McGregor, eine unerwiderte Narrin für Freunde und Miss Brody. Sie stirbt mit dreiundzwanzig in einem brennenden Hotel und entscheidet kurz vor ihrem Tod in einem traurigen Moment, dass die glücklichsten Momente in ihrem kurzen Leben diejenigen waren, die sie in Begleitung von Miss Brody und ihrem „Clan“ verbracht hat, wenn auch nur langsam denkend. Alle Mädchen verraten auf ihre Weise die Ideale von Miss Brody. Kurz bevor sie an Krebs sterben, überlebt ihr Mentor schließlich die Schule unter dem Vorwand, Kindern den Faschismus zu predigen. Tatsächlich bewunderte Miss Brodie fast naiv die Ordnung und Disziplin in den Ländern des Faschismus sowie Denkmäler und Brunnen. Und jetzt fordert Sandy Stanger, ihre Vertraute, die bereits an der Schwelle zum Abschluss steht, die Regisseurin, Miss Brodys Hauptkrankheit, auf, politische Überzeugungen zu bemängeln und Miss Brody zum Rücktritt zu zwingen. Sandy geht den schwierigsten und widersprüchlichsten Weg. Der Verrat an ihr führt zu dem Vertrauen, dass die Aktivitäten von Miss Brody letztendlich ihren Favoriten schaden. Tatsache ist, dass sich Miss Brody in einen Zeichenlehrer verliebt, Teddy Lloyd, einen großen Katholiken. Als sie merkt, dass diese Liebe nicht machbar ist, geht sie, als wollte sie sich selbst ärgern, eine Beziehung mit Gordon Loiter ein, einem Musiklehrer. Sie liebt Teddy und glaubt, dass eines der Mädchen sie ersetzen und seine Geliebte werden sollte. Sie steckt ihr Herz und ihre Seele in diesen wilden Plan, nach dem sich Rose Stanley, die weiblichste der Mädchen, stattdessen der Künstlerin ergeben sollte. Rose ist Teddy jedoch völlig gleichgültig und Sandy wird seine Geliebte. Gleichzeitig war und bleibt Miss Brody die wahre Muse der Künstlerin, und mit Erstaunen sieht Sandy, dass Miss Brodys Gesichtszüge immer in ihr auftauchten, egal welches der Mädchen des "Clans" Teddy zeichnet. Sandy, die den kalten, analysierenden Geist des Psychologen besitzt, kann das Geheimnis des mysteriösen und mächtigen Einflusses der „lustigen alten Magd“ auf alle um sie herum nicht akzeptieren. Es stellt sich bald heraus, dass einer von Miss Brodies Fans, der nicht zum "Clan" gehört, ihrer Aufregung erliegt und nach Spanien flieht, um auf der Seite des faschistischen Franco zu kämpfen. Sie stirbt unterwegs im Zug. Dann gibt Sandy entsetzt Miss Brody den Regisseur und sie deutet auf Miss Brody. Die Idee des Verrats untergräbt den unbezwingbaren Geist von Miss Brody. Bis zu ihrem Tod quält sie sich und andere immer wieder mit unfruchtbaren Spekulationen. Tatsächlich scheint es Sandy, dass der gesamte "Clan" Miss Brody verrät und auf die "Berufungen" verzichtet. Miss Brody sah in ihren Mädchen „Instinkt und Einsicht“, die eines vollen und lebendigen Lebens würdig waren. Nach dem Verrat geht Sandy ins Kloster, wo sie unglücklich und enttäuscht ist. Rose Stanley wird eine tugendhafte Frau, obwohl sie eine neue Venus hat, "eine große Geliebte", so Miss Brody. Aber sie alle haben das Gefühl, sich selbst getäuscht zu haben.
Während der jahrelangen Freundschaft mit Miss Brody sind sie so von ihrem Glauben durchdrungen, dass sie eine innere spirituelle Ähnlichkeit mit ihr annehmen, die der Künstler Teddy Lloyd in seinen Gemälden korrekt festgehalten hat.